本文摘要：奶粉中维生素含量是奶粉质量的一个最重要指标，目前对奶粉中脂溶性维生素A、D3、E测量的前处置方法多使用酶求解及皂化方法除去脂肪［1-6］。酶求解由于试剂便宜，操作者繁复，呼吸困难用作大批量实际样品的测量；皂化过程中用于大量的有机溶剂且操作步骤简单，维生素D3样品还须要经硅胶柱做到更进一步的净化才能展开检测，导致实验时间成本的减少，某种程度有利于大批量样品的检测。

奶粉中维生素含量是奶粉质量的一个最重要指标，目前对奶粉中脂溶性维生素A、D3、E测量的前处置方法多使用酶求解及皂化方法除去脂肪［1-6］。酶求解由于试剂便宜，操作者繁复，呼吸困难用作大批量实际样品的测量；皂化过程中用于大量的有机溶剂且操作步骤简单，维生素D3样品还须要经硅胶柱做到更进一步的净化才能展开检测，导致实验时间成本的减少，某种程度有利于大批量样品的检测。

　　鉴于上述情况，本公司研究了利用固相萃取法作为奶粉样品的前处置方法，高效液相色谱法作为检测手段，构建同时测量奶粉中维生素A、D3、E的含量，创建了简单、较慢测量全脂奶粉中维生素A、D3、E的固相提取-高效液相色谱法，该方法可大大简化奶粉样品的前处理过程。　　1实验部分　　1.1仪器及材料　　仪器：AgelaLC-10F；涡旋混合器；超声仪；离心机；氮刮起仪；万分之一天平。　　材料：CleanertFAT油脂专用柱；石油醚（30℃~60℃沸程）、甲醇、正己烷、乙酸乙酯皆为色谱显；维生素A标准品；维生素D3标准品；维生素E标准品；某品牌全脂奶粉；0.22mNylon滤头。　　1.2液相色谱条件　　色谱柱：VenusilMPC18，4.6mm*150mm，5m；　　流动互为：甲醇；　　流速：1mL/min；　　柱温：30℃；　　入样量：20L；　　波长变化闻表格1：表格1波长变化梯度表格化合物时间（min）波长(nm)维生素A0325维生素D35264维生素E8.5294　　1.3样品处置　　用分析天平所取1g奶粉样品于离心管中，重新加入10mL石油醚，涡旋2min，成像2min，于4000r/min下离心5min，移往上清液至整洁的样品瓶中，待净化。

　　SPE过程如下：　　（1）活化：将5mL正己烷过CleanertFAT柱；　　（2）上样：将待净化液上样到CleanertFAT柱；　　（3）淋洗：用5mL正己烷淋洗CleanertFAT柱；　　（4）洗刷：用5mL乙酸乙酯洗刷CleanertFAT柱，搜集洗脱液。　　上述操作步骤皆为溶剂由重力起到滴下，不须要产生外力。将洗脱液于35℃氮吹干，用1mL甲醇重定怀，涡旋30秒，0.22mNylon滤头过滤器，待HPLC检测。　　2结果与辩论　　2.1标准溶液色谱图　　所取标准溶液按照液相色谱条件展开分析，获得色谱图如图1：图1低浓度维生素标准溶液的色谱图　　样品浓度为：维生素A（0.5g/mL）、维生素D3（0.98g/mL）、维生素E（9.。

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